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    病毒大規(guī)模培養(yǎng)神器-微載體 Cytodex(入門篇)

    點擊次數(shù):3025 更新時間:2021-07-01

    病毒大規(guī)模培養(yǎng)神器

    微載體 Cytodex

    入門篇

    近期疫情逐漸穩(wěn)定,希望新的一年大家心寬體「胖」。 因為微載體的貼壁培養(yǎng)工藝廣泛應(yīng)用在疫苗的大規(guī)模生產(chǎn)中,接下來,咱們就聊聊病毒大規(guī)模培養(yǎng)的神器-微載體。那么什么是微載體?不同類型微載體的特點?微載體如何操作?以及有哪些成功的應(yīng)用案例呢?

    圖 1 Cytodex 微載體上的 Vero 細胞(染色)

    01

    什么是 Cytodex 微載體?

    Cytodex 微載體是專門為培養(yǎng)各種動物細胞的高產(chǎn)量而開發(fā)的,針對不同類型動物細胞,有 Cytodex 和 Cytopore 兩個系列(見圖 1),在這里詳細地給大家介紹下 Cytodex。

    Cytodex 微載體(Cytodex 1&3)是基質(zhì)為葡聚糖的微球,細胞可貼附微球 2D 表面生長,1 g 的 Cytodex1 微載體提供 4400 cm 2 的表面積給細胞貼附。 Cytodex 1幾乎適合所有貼壁細胞。 Cytodex 3表面包被膠原,適合無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)。除標準的 Cytodex 產(chǎn)品外, Cytodex 還有經(jīng)過 Gamma 射線滅菌的產(chǎn)品,無需繁瑣的水化滅菌,可以直接使用。

    Cytodex 微載體的特點

    表面特征經(jīng)過優(yōu)化,適于細胞高效粘附和伸展;

    大小和密度經(jīng)過優(yōu)化,有利于均勻懸浮,適于寬范圍的細胞優(yōu)良生長和高產(chǎn);

    基質(zhì)是生物惰性的,為攪拌培養(yǎng)提供了一個堅硬但是非剛性的底物;

    透明,貼附的細胞用簡單的顯微鏡就能觀察到。

    可放大性好。動物細胞懸浮培養(yǎng)已經(jīng)達到 15,000 L 規(guī)模,貼壁依賴型細胞的微載體培養(yǎng)已經(jīng)達到 6,000 L 規(guī)模。

    表 1 微載體的詳細參數(shù)

    02

    微載體有哪些應(yīng)用?

    微載體的應(yīng)用領(lǐng)域非常廣泛,疫苗、單克隆抗體、天然和重組蛋白,還有前景廣闊的免疫細胞治療領(lǐng)域。

    歐洲和世界范圍內(nèi)的許多國家的絕大多數(shù)減毒或滅活疫苗類型的人用和獸用疫苗都在使用微載體進行生產(chǎn)(見表 2)?;谖⑤d體生產(chǎn)的疫苗包括脊髓灰質(zhì)炎、風疹、狂犬病、流感、日本腦炎(乙型腦炎)、呼吸道合胞病毒(RSV)和口蹄疫(FMD)疫苗等。與其他細胞培養(yǎng)工藝相比,微載體培養(yǎng)工藝可以提高產(chǎn)量,降低成本,并減少污染。Sinskey 等人觀察,使用微載體培養(yǎng)工藝,新德畢斯病毒(Sindbis virus)的單位體積產(chǎn)量可以達到滾瓶培養(yǎng)的 50 多倍。

    表 2 微載體在疫苗工業(yè)中的應(yīng)用狀況

    03

    Cytodex 微載體

    可以培養(yǎng)哪些細胞?

    實際上,所有培養(yǎng)的動物細胞類別都可培養(yǎng)。Cytodex1 微載體是一般應(yīng)用的細胞培養(yǎng)表面,凡是能在體外貼壁的細胞將都能夠粘附到 Cytodex1 微載體上。Cytodex3 也為許多在玻璃或者塑料表面粘附或者功能較弱的細胞 類型提供了一個改良的培養(yǎng)表面。

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    表 3 按組織分類的在 Cytodex 微載體上培養(yǎng)的細胞類型列表

    哺乳動物、禽類、魚和昆蟲細胞已經(jīng)在 Cytodex 微載體上培養(yǎng), 它們具有廣泛的組織來源,包括 原代細胞, 二倍體細胞株和 傳代/轉(zhuǎn)化的細胞系。雜交細胞系和腫瘤來源的細胞系也可以,根據(jù)相關(guān)統(tǒng)計大約有 150 多種細胞可以在 Cytodex 微載體上培養(yǎng)。

     

    快看看你的細胞

    可以在微載體上培養(yǎng)嗎?

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